Family site
 
Confocal Core Home > Facilities > Co-facility >Confocal Core
 
 
  ¼Ò°³

»ý¸í°úÇÐ ºÐ¾ßÀÇ °ý¸ñÇÒ ¸¸ÇÑ ¹ßÀü°ú Çö¹Ì°æÀÇ ¹ß´Þ »çÀÌ¿£ ¶¿ ¼ö ¾ø´Â Áß¿äÇÑ °ü°è°¡ ÀÖ´Ù
ƯÈ÷ °øÃÊÁ¡ ·¹ÀÌÀú ÁÖ»çÇö¹Ì°æ (Confocal Laser Scanning Microscope: CLSM)Àº ·¹ÀÌÀú¸¦ ±¤¿øÀ¸·Î ÇÏ´Â Çö¹Ì°æÀ¸·Î ±âÁ¸ÀÇ Çü±¤Çö¹Ì°æ¿¡ ºñÇÏ¿© ÀÌ·ÐÀûÀ¸·Î 1.4¹è ÇØ»ó·ÂÀÌ ¿ùµîÇÑ ¿µ»óÀ» ¾òÀ» ¼ö ÀÖÀ¸¸ç, ·¹ÀÌÀú¸¦ »ç¿ëÇϱ⠶§¹®¿¡ ±¤ ÀýÆíÀ» ¸¸µé¾î »ïÂ÷¿ø ¿µ»óÀ» °üÂûÇÒ ¼ö ÀÖÀ¸¸ç, »ý¸í°úÇко߿¡¼­´Â »ì¾Æ ÀÖ´Â ½Ã·á¸¦ ´ë»óÀ¸·Î »ý¸®ÇÐÀûÀÎ ±â´É ¿¬±¸¿¡ ´ëÇÑ °ü½ÉÀ» ÃæÁ·½Ãų ¼ö ÀÖ´Â ÇʼöÀûÀÎ Àåºñ·Î½á »ý¸í°úÇко߿¡ ¾ø¾î¼­´Â ¾ÈµÉ Çö¹Ì°æÀÌ´Ù.

Confocal Çö¹Ì°æÀº »ýüÀÇ Á¶Á÷ ³»ºÎÀÇ »ïÂ÷¿ø Çü»óÀ» °íÇØ»óµµ·Î °üÃøÇÒ ¼ö ÀÖ°Ô µÇ¾î ±âÃÊ ÀÇÇÐÀÇ ¹ßÀü¿¡ Áö´ëÇÑ °øÇåÀ» ÀÌ·ç°í ÀÖ´Ù. À̹ۿ¡µµ ÃÖ±Ù¿¡´Â HTS (High through put) °³³äÀ¸·Î ¸¹Àº ½Ã·á¸¦ ¼¼Æ÷ ¼öÁØ¿¡¼­ ºü¸¥ ½Ã°£¿¡ ½ºÅ©¸®´× ÇÒ ¼ö ÀÖ´Â ±â±â·Î °³¹ßµÇ¾î ½Å¾à°³¹ß¿¡ Ȱ¿ëµÇ°í ÀÖ´Ù.

°øÃÊÁ¡À̶õ ÇÑ Á¡ÀÇ ±¤¿øÀÎ ´ÜÀÏÆÄÀåÀÇ ·¹ÀÌÀú¸¦ Á¶¸®°³¸¦ »ç¿ëÇØ¼­ ½Ã·áÀÇ ÃÊÁ¡°ú ¸ÂÁö ¾Ê´Â ºûÀº Á¦°ÅÇϰí ÃÊÁ¡°ú ÀÏÄ¡ÇÏ´Â ºû¸¸À» °ËÃâ±â¿¡ Àü´ÞÇÏ´Â ±â¼ú·Î¼­, ·¹ÀÌÀú¿Í °ËÃâ±â°¡ ÇϳªÀÇ ÃÊÁ¡À» °øÀ¯ÇÏ´Â °ÍÀÌ´Ù.

°øÃÊÁ¡ ·¹ÀÌÀú ÁÖ»çÇö¹Ì°æÀº ±âÁ¸ÀÇ Çö¹Ì°æ°ú´Â ´Ù¸£°Ô ·¹ÀÌÀú¸¦ ±¤¿øÀ¸·Î »ç¿ëÇÏ¿©, ½Ã·á·ÎºÎÅÍ ÀÏÁ¤ÇÑ ÆÄÀ念¿ªÀÇ ºûÀ» ¹ß±¤Çϵµ·Ï Çϸç, ´ë¹°·»Áî(Objective lens)¸¦ Áö³ª ÃÊÁ¡ÀÌ Á¤È®ÇÏ°Ô ¸Â´Â ºû ¸¸À» °ËÃâ±â Á¶¸®°³ (Detector aperture)·Î ºÐ¸®ÇÑ ÈÄ ¹Î°¨ÇÑ °ËÃâ±â (Photomultiplier tube: PMT)·Î ¹Þ¾Æ µðÁöÅÐ ½ÅȣȭÇÏ¿© ÄÄÇ»ÅÍ·Î Àü¼ÛÇÏ°Ô µÈ´Ù.

µðÁöÅ» ¿µ»óÀ» ±¸ÇöÇÒ ¶§, ½Ã·á·ÎºÎÅÍ ºÐ»êµÇ°Å³ª ÃÊÁ¡¿¡¼­ ¹þ¾î³­ °ÍµéÀ» ¿ø·¡ÀÇ À§Ä¡·Î º¹¿ø (Resotoration) ÇÏ´Â ÀÏ·ÃÀÇ °úÁ¤ Áß Deconvolution À̶õ ¹æ¹ýÀÌ ÀÖ´Ù. ´ëºÎºÐÀÇ Çö¹Ì°æµéÀº 2Â÷¿ø ³»¿¡¼­´Â Á¤¹ÐÇÑ »óÀ» ¾òÀ» ¼ö ÀÖÀ¸³ª, 2Â÷¿ø ¿µ»óÀ¸·Î 3 Â÷¿ø ±¸Á¶¸¦ Àç ±¸¼ºÇÏ°Ô µÇ¸é ½Ã·á ³» ºûÀÇ ºÐ»ê°ú ÃÊÁ¡À» ¹þ¾î³­ ºûÀ¸·Î ÀÎÇØ À̹ÌÁö È帲À̳ª ¹øÁü Çö»óÀÌ ³ªÅ¸³ª°Ô µÈ´Ù. ÀÌ·¯ÇÑ À̹ÌÁö È帲 Çö»óÀº Çö¹Ì°æÀÇ Point Spread Function (PSF) ¿¡ ÀÇÇØ Ç¥º»ÀÇ »óÀÌ ¹¶Ä§À¸·Î½á ÀϾ°Ô µÇ´Âµ¥ È帲 Çö»óÀ» ¹Ýº¹ÀûÀ¸·Î Deconvolution °úÁ¤À» ÅëÇÏ¿© Á¦°ÅÇÏ¸é ¾ò¾îÁø »óÀº ¸íÈ®ÇØÁö°í Á¤·®È­ ÇÒ ¼öµµ ÀÖ°Ô µÈ´Ù

 
  Confocal Çö¹Ì°æÀÇ ¿ëµµ
»ýüÁ¶Á÷°ú ¼¼Æ÷ÀÇ ±¸Á¶¿Í ´Ü¹éÁúÀ» ½Ç½Ã°£À¸·Î °üÂûÇÒ ¼ö ÀÖÀ¸¸ç, »ýüÁ¶Á÷¿¡ ¼Õ»óÀ» ÃÖ¼ÒÈ­Çϸ鼭 3Â÷¿øÀû ¼¼Æ÷ ¹× Á¶Á÷ÀÇ ´Ü¸é¿¡ ´ëÇÑ Á¤º¸¸¦ ¾òÀ» ¼ö ÀÖ´Ù.
¶Ç °íÁ¤µÈ Á¶Á÷ ȤÀº »ì¾Æ ÀÖ´Â ¼¼Æ÷¸¦ ½Ç½Ã°£À¸·Î °üÂûÇÒ ¼ö ÀÖ°í ´ÙÇü±¤ Ç¥Áö¸¦ ÅëÇÑ ´Ü¹éÁú ºÐÆ÷ ¾ç»ó °üÂûÀº ¹°·Ð ´Ü¹éÁúÀÇ È­ÇÐÀû º¯È­¸¦ °¨ÁöÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù.

Confocal Laser Scanning Microscope with ConfoCor3
(°øÃÊÁ¡ ·¹ÀÌÀú ÁÖ»ç Çö¹Ì°æ)

LSM510 / Carl Zeiss MicroImaging GmbH, µ¶ÀÏ
 
  Confocal Çö¹Ì°æÀÇ ¿ø¸® ¹× ÀåÁ¡
ÇöÀç ÀÇÇÐ,»ý¹° ¿¬±¸ ¹× ½ÇÇè¿¡ À־ Çü±¤À» ÀÌ¿ëÇÑ ÃֽнÇÇè ±â¹ýµéÀº ³í¹® ³»¿ë¿¡ ¸¹Àº ºÎºÐÀ» Â÷ÁöÇÏ´Â °¡Àå ÇʼöÀûÀÎ ºÎºÐÀÌ´Ù. Çü±¤À» ÀÌ¿ëÇÏ¿© ¾òÀ» ¼ö ÀÖ´Â ÀåÁ¡Àº À°¾ÈÀ¸·Î °üÂûÀÌ ºÒ°¡´ÉÇÑ ´Ü¹éÁú ¹× ¹ÙÀÌ·¯½ºÀÇ ¹ßÇöÀ§Ä¡¸¦ À̹ÌÁö·Î ¾òÀ» ¼ö ÀÖ°í, µ¿½Ã¿¡ 4°¡ÁöÀÇ ¼­·Î ´Ù¸¥ »öÀÇ Çü±¤À¸·Î °¢°¢ ´Ù¸¥ ´Ü¹éÁú ¹× ¼¼Æ÷ ¼Ò±â°üµîÀ» Ç¥ÁöÇÒ ¼ö ÀÖ¾î Á¤È®ÇÏ°í ¸¹Àº Á¤º¸¸¦ µ¿½Ã¿¡ ¾òÀ» ¼ö ÀÖ´Ù. ¶ÇÇÑ ÃÖ±Ù¿¡ GFP(ÃÊ·Ï»ö Çü±¤ ´Ü¹éÁú)°¡ ÀÇÇÐ ½ÇÇè¿¡ µµÀԵǸ鼭 ÀϹÝÀûÀÎ °íÁ¤ ½Ã·á »Ó¸¸ ¾Æ´Ï¶ó »ì¾ÆÀÖ´Â ¼¼Æ÷ ³»¿¡¼­ÀÇ Æ¯Á¤ ´Ü¹éÁú ¹ßÇö ¹× À§Ä¡ µîÀ» ½Ç½Ã°£À¸·Î ºÐ¼®ÇÒ ¼ö ÀÖ´Â ±â¹ýÀÌ °³¹ßµÇ¾î ÀÖ´Ù.

±×·¯³ª ±âÁ¸ Çü±¤ Çö¹Ì°æÀ¸·Î ½Ã·á¸¦ °Ë°æÇÏ°Ô µÇ¸é ¼±¸íÇÏ°Ô º¸ÀÌÁö ¾Ê¾Æ Á¤È®ÇÑ °á°ú À̹ÌÁö¸¦ ¾ò´Â °ÍÀÌ ºÒ°¡´ÉÇÏ´Ù.

Confocal Çö¹Ì°æÀº ·¹ÀÌÀú¸¦ ÀÌ¿ëÇÏ¿© ½Ã·áÀÇ ÇÑ ºÎºÐ(1 pixel)¾¿ ¸¸ ¿©±â ½Ã۰í ÇÉȦÀ» ÀÌ¿ëÇÏ¿© Á¤È®ÇÏ°Ô ÃÊÁ¡ÀÌ ¸Â´Â ¼±¸íÇÑ À̹ÌÁö ¸¸À» ÃëµæÇϰí ÃÊÁ¡ÀÌ ¸ÂÁö ¾Ê´Â ºÎºÐÀº Á¦°Å ÇÏ¿© ƯÁ¤ ÃÊÁ¡¿¡¼­ °í¹èÀ², ÃʰíÇØ»óµµ Çü±¤ À̹ÌÁö °á°ú¸¦ ¾òÀ» ¼ö ÀÖ´Â ÀåºñÀÌ´Ù. ÀÌ¿¡ Àü¼¼°è ±×¸®°í ±¹³»¿¡¼­µµ ³í¹®¿¡ ÷ºÎµÇ´Â Çü±¤À̹ÌÁö´Â ´ëºÎºÐ Confocal Çö¹Ì°æÀ» ÀÌ¿ëÇÏ¿© Á¦ÀÛÇϰí ÀÖ°í, »ý¹° ÀÇÇÐ ±¹Á¦ Àú³Î reviewer µéµµ Çü±¤À̹ÌÁö °á°ú´Â ²À Confocal Çö¹Ì°æÀ¸·Î Á¦ÀÛÇÏ¿© Åõ°í Çϵµ·Ï °­·ÂÇÏ°Ô ±ÇÀåÇϰí ÀÖ´Ù. ¶ÇÇÑ ±Ù·¡¿¡ ¸¹Àº °³¹ßÀÌ ÁøÇàµÇ¾î ´ÜÀ§ ½Ã°£ ´ç ¸¹Àº À̹ÌÁö¸¦ ¾òÀ» ¼ö ÀÖ¾î »ý¼¼Æ÷ Çü±¤ À̹Ì¡(live cell imaging) °á°úµµ ¾à 80% Á¤µµ´Â Confocal Çö¹Ì°æÀ» ÀÌ¿ëÇÏ¿© ¾ò°í ÀÖ´Ù.
ƯÈ÷ ¾Ï¼¼Æ÷ ¹× ´ç´¢ ¿¬±¸¿¡´Â ¼¼Æ÷ºÎÅÍ Á¶Á÷±îÁö ´Ù¾çÇÑ ½Ã·áÀÇ Çü±¤ À̹ÌÁö °á°ú¸¦ ¾ò¾î¾ß Çϴµ¥ À̸¦ À§Çؼ­ ±âÁ¸ÀÇ Çü±¤ Çö¹Ì°æÀº ¸¹Àº Á¦ÇÑÀÌ ÀÖ°í, °á°ú ¶ÇÇÑ Á¤È®ÇÏÁö ¾Ê±â ¶§¹®¿¡ À§ÀÇ ¿¬±¸¸¦ À§ÇÏ¿© Confocal Çö¹Ì°æÀº ÇʼöÀûÀÎ Àåºñ¶ó ÇϰڴÙ.
 
  ±Ô°Ý
Lasers ´ëºÎºÐÀÇ Çü±¤¹°Áú¿¡ ´ëÀÀÇÏ´Â 4°¡Áö ·¹ÀÌÀú ¼Ò½º(»ç¿ëÆÄÀå 7°¡Áö)
Multi-Argon laser 458/477/488/514nm, 30mW
(Àû¿ë°¡´É Çü±¤¹°Áú: CFP, GFP, FITC, Alexa 488, Cy2, YFP, Fluo-3, BCECF..)
HeNe laser 543nm, 1mW
(Àû¿ë°¡´É Çü±¤¹°Áú : Rhodamine, Cy3, Alexa 546, Texas Red, RFP, DsRed¡¦)
HeNe laser 633nm, 5mW
(Àû¿ë°¡´É Çü±¤¹°Áú: Cy5, Alexa 633¡¦)
UV Diode 405nm, 30mW
(Àû¿ë°¡´É Çü±¤¹°Áú : DAPI, Hoechest, BFP, PA-GFP, KAEDE¡¦)
À§ÀÇ ·¹ÀÌÀúµé·Î ÀÇÇÐ, »ý¹°ÇÐ ¿¬±¸¿¡¼­ »ç¿ëµÇ´Â ´ëºÎºÐÀÇ Çü±¤¹°ÁúÀ» ¿©±â½Ãų ¼ö ÀÖ°í Æ¯È÷ UV laser 405nmÀÇ °æ¿ì,ÀÌ ±¤¿øÀ» ÀÌ¿ëÇÑ ÃֽнÇÇè±â¹ýµéÀÌ ¸¹ÀÌ °³¹ßµÇ¾î ÀÖ´Â »óÅÂÀÌ´Ù.
Objectives 10x, 20x, 40x(water immulsion), 100x (oil immulsion for high magnification)
Àú¹èÀ²ºÎÅÍ °í¹èÀ²±îÁö ¼¼Æ÷ ¹× Á¶Á÷ÀÇ °íÇØ»óµµ Çü±¤À̹ÌÁö¸¦ ¾òÀ» ¼ö ÀÖ´Â ÃÖ»óÀÇ ´ë¹°·»Áî·Î ±¸¼ºµÇ¾î ÀÖ´Ù.
Spectral Detection 3 confocal detectors with 3 independent piholes
°í°¨µµ ±¤ÁõÆø±â¸¦ °ËÃâ±â·Î »ç¿ëÇϱ⠶§¹®¿¡ ÃÖ¼ÒÀÇ ·¹ÀÌÀú ¼¼±â·Î ÃÊ °í°¨µµÀÇ
Çü±¤ À̹ÌÁö¸¦ ¾òÀ» ¼ö ÀÖ°í, °¢ °ËÃâ±â ¸¶´Ù µ¶¸³ÀûÀÎ ÇÉȦÀÌ ÀåÂøµÇ¾î ÀÖ¾î ´ÙÁß
Çü±¤ À̹Ì¡ ½Ã °¡Àå Á¤È®ÇÑ °íÇØ»óµµ À̹ÌÁö Á¦ÀÛÀÌ °¡´ÉÇÏ´Ù.
Åõ°ú±¤ detector Çü±¤ À̹ÌÁö »Ó ¸¸ ¾Æ´Ï¶ó Åõ°ú±¤ À̹ÌÁö¸¦ À§ÇÑ º°µµÀÇ ±¤ °ËÃâ±â°¡ ³»ÀåµÇ¾î ÀÖ¾î Çü±¤À̹ÌÁö¿Í Åõ°ú±¤ À̹ÌÁö¸¦ µ¿½Ã¿¡ Á¦ÀÛÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù. À̴ ƯÈ÷ ¾Ï¼¼Æ÷ ½ÇÇèÀÇ °æ¿ì ¼¼Æ÷ÀÇ ÇüŸ¦ ¹Ýµå½Ã º¸¿©Áà¾ß Çϱ⠶§¹®¿¡ Áß¿äÇÏ´Ù.
½ºÄµ ¼Óµµ »ì¾ÆÀÖ´Â ¼¼Æ÷ Çü±¤ À̹Ì¡ÀÌ °¡´ÉÇÑ ºü¸¥ ¼Óµµ- 1ÃÊ´ç 5ÀåÀÇ À̹ÌÁö ȹµæ °¡´É. Confocal Çö¹Ì°æÀ» ÀÌ¿ëÇÑ »ý¼¼Æ÷ À̹Ì¡ÀÌ ±Ù·¡ÀÇ ÃÖ´ë À̽´À̹ǷΠ°¡±ÞÀû ´ÜÀ§ ½Ã°£ ´ç ¸¹Àº À̹ÌÁö¸¦ ½ÀµæÇÏ´Â °ÍÀÌ Á¤È®ÇÑ °á°ú¸¦ µµÃâÇÏ´Â µ¥ Áß¿äÇÏ´Ù.
Live cell Àåºñ ¼¼Æ÷ ¹è¾ç±â¿Í µ¿ÀÏÇÑ Á¶°ÇÀ» Çö¹Ì°æ Á¦¹°´ë À§¿¡¼­ ±¸ÇöÇÏ´Â Çö¹Ì°æ¿ë ¼¼Æ÷ ¹è¾çÀåÄ¡·Î ¿Âµµ, ½Àµµ, CO2³óµµ¸¦ ÀÚµ¿À¸·Î Á¶ÀýÇÏ¿© »ì¾ÆÀÖ´Â »óÅÂÀÇ ¼¼Æ÷¸¦ Àå½Ã°£ °üÂûÇϴµ¥ ÇʼöÀûÀÎ ºÎºÐÀÌ´Ù. ƯÈ÷ Àú»ê¼Òȯ°æ ½ÇÇèÀ» À§ÇÑ O2 ÀÚµ¿ Á¶Àý ±â´É±îÁö ÀåÂøµÇ¾î ÀÖ¾î ¾Ï¼¼Æ÷ ¹× ´ç´¢ ¿¬±¸¿¡ ÃÖ»óÀÇ Á¶°ÇÀ» Á¦°øÇÑ´Ù.
 
  ¿ëµµ
ÀϹÝÀûÀÎ Confocal Çö¹Ì°æÀÇ ¿ëµµ´Â ´ÙÀ½°ú °°´Ù.
´ÙÁß Çü±¤ ¿°»öÇÑ ¼¼Æ÷ ¹× Á¶Á÷ÀÇ 2Â÷¿ø °íÇØ»óµµ °í¹èÀ² À̹Ì¡ ¹× Á¤·®ºÐ¼®
Confocal Çö¹Ì°æÀÇ ¿ø¸®¸¦ ÀÌ¿ëÇÑ 3Â÷¿ø Çü±¤ À̹Ì¡
Åõ°ú±¤ °ËÃâ±â¸¦ ÀÌ¿ëÇÑ ¼¼Æ÷ÀÇ ÇüÅ ºÐ¼® ¹× Çü±¤ À̹ÌÁö¿ÍÀÇ ´ëÁ¶ Confocal Çö¹Ì°æÀÇ Ãֽбâ¹ýÀº ´ÙÀ½°ú °°´Ù.
GFP(ÃÊ·Ï»ö Çü±¤ ´Ü¹éÁú)¸¦ ÀÌ¿ëÇÑ Àå½Ã°£ »ý¼¼Æ÷ À̹Ì¡(¾Ï¼¼Æ÷ÀÇ º¯È­°üÂû)
Ä®½· ÀεðÄÉÀÌÅ͸¦ ÀÌ¿ëÇÑ ¼¼Æ÷³»ÀÇ Ä®½· À̿ À̹Ì¡À» ÀÌ¿ëÇÑ ¹ß¾Ï ¹× ¾Ï¾ïÁ¦Á¦ °³¹ß ¿¬±¸
·¹ÀÌÀú¸¦ ÀÌ¿ëÇÑ Æ¯Á¤ ´Ü¹éÁúÀÇ ÀÚ±Ø ¹× ½Ã°£¿¡ µû¸¥ º¯È­ °á°ú ºÐ¼®
ÃֽŠÇü±¤ ´Ü¹éÁúÀÎ PA-GFP¹× KAEDE¸¦ ÀÌ¿ëÇÑ »ý¼¼Æ÷ À̹Ì¡
3Â÷¿ø À̹ÌÁö¸¦ ½Ã°£ °æ°ú¿¡ µû¶ó Á¦ÀÛÇÏ´Â 4Â÷¿ø À̹Ì¡
±×¿Ü »ý¸®ÇÐ, º´¸®ÇÐ, ¾à¸®ÇÐ, ¼¼Æ÷ÇÐ ¿¬±¸¿¡ ÇÊ¿äÇÑ °íÇØ»óµµ °í¹èÀ² Çü±¤ À̹Ì¡
 
  °á·Ð
Confocal Çö¹Ì°æÀº Çö´ë ÀÇÇÐ ¿¬±¸¿¡ À־ ¹Ýµå½Ã ÇÊ¿äÇÑ ÀåºñÀ̸ç ÀÌ Àåºñ¸¦ ÀÌ¿ëÇÏ¿© µµÃâÇØ³½ °á°ú¹°µéÀº ¼¼°è À¯¼öÀÇ Àú³Î¿¡¼­ ÀÎÁ¤ÇϵíÀÌ »ó´çÈ÷ ½Å·Úµµ°¡ ³ô´Ù. ÇöÀç ÀÌ Àåºñ¸¦ ´ëÄ¡ÇÒ¸¸ÇÑ Àåºñ´Â ¾ÆÁ÷ »ý»êÀÌ µÇ°í ÀÖÁö ¾ÊÀ¸¸ç ¾ÕÀ¸·Îµµ ±× Á߿伺Àº ´õ¿í Áõ°¡ µÉ °ÍÀÌ´Ù.
 
  Copyright 2008 Lee Gil Ya Cancer and Diabetes Institute. All rights Reserved.
Address. 7-45, Songdo-dong, Yeonsu-ku, Incheon City, Korea 406-840 Tel. 032-899-6030