Family site
¹Ù·Î°¡±â
°¡ÃµÀǰúÇдëÇб³
°¡Ãµ¾Ï´ç´¢¿¬±¸¿ø WCU
°¡Ãµ¾Ï´ç´¢¿¬±¸¿ø ½ÇÇ赿¹°¼¾ÅÍ
°¡Ãµ±æÀç´Ü
°æ¿ø´ëÇб³
°æÀÎÀϺ¸
°¡Ãµ¹Ú¹°°ü
°¡ÃµÀη°³¹ß¿ø
°æ¿ø´ëºÎ¼ÓÇѹ溴¿ø
»õ»ý¸íã¾ÆÁÖ±â¿îµ¿º»ºÎ
Confocal Core
Home > Facilities
> Co-facility >Confocal Core
»ý¸í°úÇÐ ºÐ¾ßÀÇ °ý¸ñÇÒ ¸¸ÇÑ ¹ßÀü°ú Çö¹Ì°æÀÇ
¹ß´Þ »çÀÌ¿£ ¶¿ ¼ö ¾ø´Â Áß¿äÇÑ °ü°è°¡ ÀÖ´Ù
ƯÈ÷ °øÃÊÁ¡ ·¹ÀÌÀú ÁÖ»çÇö¹Ì°æ (Confocal Laser Scanning
Microscope: CLSM)Àº ·¹ÀÌÀú¸¦ ±¤¿øÀ¸·Î ÇÏ´Â Çö¹Ì°æÀ¸·Î ±âÁ¸ÀÇ
Çü±¤Çö¹Ì°æ¿¡ ºñÇÏ¿© ÀÌ·ÐÀûÀ¸·Î 1.4¹è ÇØ»ó·ÂÀÌ ¿ùµîÇÑ ¿µ»óÀ» ¾òÀ» ¼ö ÀÖÀ¸¸ç,
·¹ÀÌÀú¸¦ »ç¿ëÇϱ⠶§¹®¿¡ ±¤ ÀýÆíÀ» ¸¸µé¾î »ïÂ÷¿ø ¿µ»óÀ» °üÂûÇÒ ¼ö ÀÖÀ¸¸ç,
»ý¸í°úÇко߿¡¼´Â »ì¾Æ ÀÖ´Â ½Ã·á¸¦ ´ë»óÀ¸·Î »ý¸®ÇÐÀûÀÎ ±â´É ¿¬±¸¿¡ ´ëÇÑ °ü½ÉÀ»
ÃæÁ·½Ãų ¼ö ÀÖ´Â ÇʼöÀûÀÎ Àåºñ·Î½á »ý¸í°úÇко߿¡ ¾ø¾î¼´Â ¾ÈµÉ Çö¹Ì°æÀÌ´Ù.
Confocal Çö¹Ì°æÀº »ýüÀÇ Á¶Á÷ ³»ºÎÀÇ »ïÂ÷¿ø Çü»óÀ» °íÇØ»óµµ·Î °üÃøÇÒ
¼ö ÀÖ°Ô µÇ¾î ±âÃÊ ÀÇÇÐÀÇ ¹ßÀü¿¡ Áö´ëÇÑ °øÇåÀ» ÀÌ·ç°í ÀÖ´Ù. À̹ۿ¡µµ ÃÖ±Ù¿¡´Â
HTS (High through put) °³³äÀ¸·Î ¸¹Àº ½Ã·á¸¦ ¼¼Æ÷ ¼öÁØ¿¡¼
ºü¸¥ ½Ã°£¿¡ ½ºÅ©¸®´× ÇÒ ¼ö ÀÖ´Â ±â±â·Î °³¹ßµÇ¾î ½Å¾à°³¹ß¿¡ Ȱ¿ëµÇ°í ÀÖ´Ù.
°øÃÊÁ¡À̶õ ÇÑ Á¡ÀÇ ±¤¿øÀÎ ´ÜÀÏÆÄÀåÀÇ ·¹ÀÌÀú¸¦ Á¶¸®°³¸¦ »ç¿ëÇØ¼ ½Ã·áÀÇ ÃÊÁ¡°ú
¸ÂÁö ¾Ê´Â ºûÀº Á¦°ÅÇϰí ÃÊÁ¡°ú ÀÏÄ¡ÇÏ´Â ºû¸¸À» °ËÃâ±â¿¡ Àü´ÞÇÏ´Â ±â¼ú·Î¼,
·¹ÀÌÀú¿Í °ËÃâ±â°¡ ÇϳªÀÇ ÃÊÁ¡À» °øÀ¯ÇÏ´Â °ÍÀÌ´Ù.
°øÃÊÁ¡ ·¹ÀÌÀú ÁÖ»çÇö¹Ì°æÀº ±âÁ¸ÀÇ Çö¹Ì°æ°ú´Â ´Ù¸£°Ô ·¹ÀÌÀú¸¦ ±¤¿øÀ¸·Î »ç¿ëÇÏ¿©,
½Ã·á·ÎºÎÅÍ ÀÏÁ¤ÇÑ ÆÄÀ念¿ªÀÇ ºûÀ» ¹ß±¤Çϵµ·Ï Çϸç, ´ë¹°·»Áî(Objective
lens)¸¦ Áö³ª ÃÊÁ¡ÀÌ Á¤È®ÇÏ°Ô ¸Â´Â ºû ¸¸À» °ËÃâ±â Á¶¸®°³ (Detector
aperture)·Î ºÐ¸®ÇÑ ÈÄ ¹Î°¨ÇÑ °ËÃâ±â (Photomultiplier
tube: PMT)·Î ¹Þ¾Æ µðÁöÅÐ ½ÅÈ£ÈÇÏ¿© ÄÄÇ»ÅÍ·Î Àü¼ÛÇÏ°Ô µÈ´Ù.
µðÁöÅ» ¿µ»óÀ» ±¸ÇöÇÒ ¶§, ½Ã·á·ÎºÎÅÍ ºÐ»êµÇ°Å³ª ÃÊÁ¡¿¡¼ ¹þ¾î³ °ÍµéÀ» ¿ø·¡ÀÇ
À§Ä¡·Î º¹¿ø (Resotoration) ÇÏ´Â ÀÏ·ÃÀÇ °úÁ¤ Áß Deconvolution
À̶õ ¹æ¹ýÀÌ ÀÖ´Ù. ´ëºÎºÐÀÇ Çö¹Ì°æµéÀº 2Â÷¿ø ³»¿¡¼´Â Á¤¹ÐÇÑ »óÀ» ¾òÀ» ¼ö
ÀÖÀ¸³ª, 2Â÷¿ø ¿µ»óÀ¸·Î 3 Â÷¿ø ±¸Á¶¸¦ Àç ±¸¼ºÇÏ°Ô µÇ¸é ½Ã·á ³» ºûÀÇ ºÐ»ê°ú
ÃÊÁ¡À» ¹þ¾î³ ºûÀ¸·Î ÀÎÇØ À̹ÌÁö È帲À̳ª ¹øÁü Çö»óÀÌ ³ªÅ¸³ª°Ô µÈ´Ù. ÀÌ·¯ÇÑ
À̹ÌÁö È帲 Çö»óÀº Çö¹Ì°æÀÇ Point Spread Function (PSF)
¿¡ ÀÇÇØ Ç¥º»ÀÇ »óÀÌ ¹¶Ä§À¸·Î½á ÀϾ°Ô µÇ´Âµ¥ È帲 Çö»óÀ» ¹Ýº¹ÀûÀ¸·Î Deconvolution
°úÁ¤À» ÅëÇÏ¿© Á¦°ÅÇÏ¸é ¾ò¾îÁø »óÀº ¸íÈ®ÇØÁö°í Á¤·®È ÇÒ ¼öµµ ÀÖ°Ô µÈ´Ù
»ýüÁ¶Á÷°ú ¼¼Æ÷ÀÇ ±¸Á¶¿Í ´Ü¹éÁúÀ» ½Ç½Ã°£À¸·Î °üÂûÇÒ
¼ö ÀÖÀ¸¸ç, »ýüÁ¶Á÷¿¡ ¼Õ»óÀ» ÃÖ¼ÒÈÇÏ¸é¼ 3Â÷¿øÀû ¼¼Æ÷ ¹× Á¶Á÷ÀÇ ´Ü¸é¿¡ ´ëÇÑ
Á¤º¸¸¦ ¾òÀ» ¼ö ÀÖ´Ù.
¶Ç °íÁ¤µÈ Á¶Á÷ ȤÀº »ì¾Æ ÀÖ´Â ¼¼Æ÷¸¦ ½Ç½Ã°£À¸·Î °üÂûÇÒ ¼ö ÀÖ°í ´ÙÇü±¤ Ç¥Áö¸¦
ÅëÇÑ ´Ü¹éÁú ºÐÆ÷ ¾ç»ó °üÂûÀº ¹°·Ð ´Ü¹éÁúÀÇ ÈÇÐÀû º¯È¸¦ °¨ÁöÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù.
Confocal Laser Scanning Microscope with
ConfoCor3
(°øÃÊÁ¡ ·¹ÀÌÀú ÁÖ»ç Çö¹Ì°æ)
LSM510
/ Carl Zeiss MicroImaging GmbH, µ¶ÀÏ
Confocal Çö¹Ì°æÀÇ ¿ø¸® ¹× ÀåÁ¡
ÇöÀç ÀÇÇÐ,»ý¹° ¿¬±¸ ¹× ½ÇÇè¿¡ ÀÖ¾î¼ Çü±¤À»
ÀÌ¿ëÇÑ ÃֽнÇÇè ±â¹ýµéÀº ³í¹® ³»¿ë¿¡ ¸¹Àº ºÎºÐÀ» Â÷ÁöÇÏ´Â °¡Àå ÇʼöÀûÀÎ ºÎºÐÀÌ´Ù.
Çü±¤À» ÀÌ¿ëÇÏ¿© ¾òÀ» ¼ö ÀÖ´Â ÀåÁ¡Àº À°¾ÈÀ¸·Î °üÂûÀÌ ºÒ°¡´ÉÇÑ ´Ü¹éÁú ¹× ¹ÙÀÌ·¯½ºÀÇ
¹ßÇöÀ§Ä¡¸¦ À̹ÌÁö·Î ¾òÀ» ¼ö ÀÖ°í, µ¿½Ã¿¡ 4°¡ÁöÀÇ ¼·Î ´Ù¸¥ »öÀÇ Çü±¤À¸·Î °¢°¢
´Ù¸¥ ´Ü¹éÁú ¹× ¼¼Æ÷ ¼Ò±â°üµîÀ» Ç¥ÁöÇÒ ¼ö ÀÖ¾î Á¤È®ÇÏ°í ¸¹Àº Á¤º¸¸¦ µ¿½Ã¿¡ ¾òÀ»
¼ö ÀÖ´Ù. ¶ÇÇÑ ÃÖ±Ù¿¡ GFP(ÃÊ·Ï»ö Çü±¤ ´Ü¹éÁú)°¡ ÀÇÇÐ ½ÇÇè¿¡ µµÀÔµÇ¸é¼ ÀϹÝÀûÀÎ
°íÁ¤ ½Ã·á »Ó¸¸ ¾Æ´Ï¶ó »ì¾ÆÀÖ´Â ¼¼Æ÷ ³»¿¡¼ÀÇ Æ¯Á¤ ´Ü¹éÁú ¹ßÇö ¹× À§Ä¡ µîÀ»
½Ç½Ã°£À¸·Î ºÐ¼®ÇÒ ¼ö ÀÖ´Â ±â¹ýÀÌ °³¹ßµÇ¾î ÀÖ´Ù.
±×·¯³ª ±âÁ¸ Çü±¤ Çö¹Ì°æÀ¸·Î ½Ã·á¸¦ °Ë°æÇÏ°Ô µÇ¸é ¼±¸íÇÏ°Ô º¸ÀÌÁö ¾Ê¾Æ Á¤È®ÇÑ
°á°ú À̹ÌÁö¸¦ ¾ò´Â °ÍÀÌ ºÒ°¡´ÉÇÏ´Ù.
Confocal Çö¹Ì°æÀº ·¹ÀÌÀú¸¦ ÀÌ¿ëÇÏ¿© ½Ã·áÀÇ ÇÑ ºÎºÐ(1 pixel)¾¿ ¸¸
¿©±â ½Ã۰í ÇÉȦÀ» ÀÌ¿ëÇÏ¿© Á¤È®ÇÏ°Ô ÃÊÁ¡ÀÌ ¸Â´Â ¼±¸íÇÑ À̹ÌÁö ¸¸À» ÃëµæÇϰí
ÃÊÁ¡ÀÌ ¸ÂÁö ¾Ê´Â ºÎºÐÀº Á¦°Å ÇÏ¿© ƯÁ¤ ÃÊÁ¡¿¡¼ °í¹èÀ², ÃʰíÇØ»óµµ Çü±¤ À̹ÌÁö
°á°ú¸¦ ¾òÀ» ¼ö ÀÖ´Â ÀåºñÀÌ´Ù. ÀÌ¿¡ Àü¼¼°è ±×¸®°í ±¹³»¿¡¼µµ ³í¹®¿¡ ÷ºÎµÇ´Â
Çü±¤À̹ÌÁö´Â ´ëºÎºÐ Confocal Çö¹Ì°æÀ» ÀÌ¿ëÇÏ¿© Á¦ÀÛÇϰí ÀÖ°í, »ý¹° ÀÇÇÐ
±¹Á¦ Àú³Î reviewer µéµµ Çü±¤À̹ÌÁö °á°ú´Â ²À Confocal Çö¹Ì°æÀ¸·Î
Á¦ÀÛÇÏ¿© Åõ°í Çϵµ·Ï °·ÂÇÏ°Ô ±ÇÀåÇϰí ÀÖ´Ù. ¶ÇÇÑ ±Ù·¡¿¡ ¸¹Àº °³¹ßÀÌ ÁøÇàµÇ¾î
´ÜÀ§ ½Ã°£ ´ç ¸¹Àº À̹ÌÁö¸¦ ¾òÀ» ¼ö ÀÖ¾î »ý¼¼Æ÷ Çü±¤ À̹Ì¡(live cell
imaging) °á°úµµ ¾à 80% Á¤µµ´Â Confocal Çö¹Ì°æÀ» ÀÌ¿ëÇÏ¿© ¾ò°í
ÀÖ´Ù.
ƯÈ÷ ¾Ï¼¼Æ÷ ¹× ´ç´¢ ¿¬±¸¿¡´Â ¼¼Æ÷ºÎÅÍ Á¶Á÷±îÁö ´Ù¾çÇÑ ½Ã·áÀÇ Çü±¤ À̹ÌÁö °á°ú¸¦
¾ò¾î¾ß Çϴµ¥ À̸¦ À§Çؼ ±âÁ¸ÀÇ Çü±¤ Çö¹Ì°æÀº ¸¹Àº Á¦ÇÑÀÌ ÀÖ°í, °á°ú ¶ÇÇÑ
Á¤È®ÇÏÁö ¾Ê±â ¶§¹®¿¡ À§ÀÇ ¿¬±¸¸¦ À§ÇÏ¿© Confocal Çö¹Ì°æÀº ÇʼöÀûÀÎ Àåºñ¶ó
ÇϰڴÙ.
Lasers
´ëºÎºÐÀÇ Çü±¤¹°Áú¿¡ ´ëÀÀÇÏ´Â 4°¡Áö ·¹ÀÌÀú
¼Ò½º(»ç¿ëÆÄÀå 7°¡Áö)
Multi-Argon laser 458/477/488/514nm, 30mW
(Àû¿ë°¡´É Çü±¤¹°Áú: CFP, GFP, FITC, Alexa 488,
Cy2, YFP, Fluo-3, BCECF..)
HeNe laser 543nm, 1mW
(Àû¿ë°¡´É Çü±¤¹°Áú : Rhodamine, Cy3, Alexa 546,
Texas Red, RFP, DsRed¡¦)
HeNe laser 633nm, 5mW
(Àû¿ë°¡´É Çü±¤¹°Áú: Cy5, Alexa 633¡¦)
UV Diode 405nm, 30mW
(Àû¿ë°¡´É Çü±¤¹°Áú : DAPI, Hoechest, BFP, PA-GFP,
KAEDE¡¦)
À§ÀÇ ·¹ÀÌÀúµé·Î ÀÇÇÐ, »ý¹°ÇÐ ¿¬±¸¿¡¼ »ç¿ëµÇ´Â ´ëºÎºÐÀÇ Çü±¤¹°ÁúÀ»
¿©±â½Ãų ¼ö ÀÖ°í Æ¯È÷ UV laser 405nmÀÇ °æ¿ì,ÀÌ ±¤¿øÀ»
ÀÌ¿ëÇÑ ÃֽнÇÇè±â¹ýµéÀÌ ¸¹ÀÌ °³¹ßµÇ¾î ÀÖ´Â »óÅÂÀÌ´Ù.
Objectives
10x, 20x, 40x(water immulsion), 100x
(oil immulsion for high magnification)
Àú¹èÀ²ºÎÅÍ °í¹èÀ²±îÁö ¼¼Æ÷ ¹× Á¶Á÷ÀÇ °íÇØ»óµµ Çü±¤À̹ÌÁö¸¦ ¾òÀ» ¼ö
ÀÖ´Â ÃÖ»óÀÇ ´ë¹°·»Áî·Î ±¸¼ºµÇ¾î ÀÖ´Ù.
Spectral
Detection
3 confocal detectors with 3 independent
piholes
°í°¨µµ ±¤ÁõÆø±â¸¦ °ËÃâ±â·Î »ç¿ëÇϱ⠶§¹®¿¡ ÃÖ¼ÒÀÇ ·¹ÀÌÀú ¼¼±â·Î ÃÊ
°í°¨µµÀÇ
Çü±¤ À̹ÌÁö¸¦ ¾òÀ» ¼ö ÀÖ°í, °¢ °ËÃâ±â ¸¶´Ù µ¶¸³ÀûÀÎ ÇÉȦÀÌ ÀåÂøµÇ¾î
ÀÖ¾î ´ÙÁß
Çü±¤ À̹Ì¡ ½Ã °¡Àå Á¤È®ÇÑ °íÇØ»óµµ À̹ÌÁö Á¦ÀÛÀÌ °¡´ÉÇÏ´Ù.
Åõ°ú±¤
detector
Çü±¤ À̹ÌÁö »Ó ¸¸ ¾Æ´Ï¶ó Åõ°ú±¤ À̹ÌÁö¸¦ À§ÇÑ º°µµÀÇ ±¤ °ËÃâ±â°¡
³»ÀåµÇ¾î ÀÖ¾î Çü±¤À̹ÌÁö¿Í Åõ°ú±¤ À̹ÌÁö¸¦ µ¿½Ã¿¡ Á¦ÀÛÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù.
À̴ ƯÈ÷ ¾Ï¼¼Æ÷ ½ÇÇèÀÇ °æ¿ì ¼¼Æ÷ÀÇ ÇüŸ¦ ¹Ýµå½Ã º¸¿©Áà¾ß Çϱ⠶§¹®¿¡
Áß¿äÇÏ´Ù.
½ºÄµ
¼Óµµ
»ì¾ÆÀÖ´Â ¼¼Æ÷ Çü±¤ À̹Ì¡ÀÌ °¡´ÉÇÑ ºü¸¥ ¼Óµµ- 1ÃÊ´ç 5ÀåÀÇ À̹ÌÁö
ȹµæ °¡´É. Confocal Çö¹Ì°æÀ» ÀÌ¿ëÇÑ »ý¼¼Æ÷ À̹Ì¡ÀÌ ±Ù·¡ÀÇ
ÃÖ´ë À̽´À̹ǷΠ°¡±ÞÀû ´ÜÀ§ ½Ã°£ ´ç ¸¹Àº À̹ÌÁö¸¦ ½ÀµæÇÏ´Â °ÍÀÌ Á¤È®ÇÑ
°á°ú¸¦ µµÃâÇÏ´Â µ¥ Áß¿äÇÏ´Ù.
Live
cell Àåºñ
¼¼Æ÷ ¹è¾ç±â¿Í µ¿ÀÏÇÑ Á¶°ÇÀ» Çö¹Ì°æ Á¦¹°´ë À§¿¡¼ ±¸ÇöÇÏ´Â Çö¹Ì°æ¿ë
¼¼Æ÷ ¹è¾çÀåÄ¡·Î ¿Âµµ, ½Àµµ, CO2³óµµ¸¦ ÀÚµ¿À¸·Î Á¶ÀýÇÏ¿© »ì¾ÆÀÖ´Â
»óÅÂÀÇ ¼¼Æ÷¸¦ Àå½Ã°£ °üÂûÇϴµ¥ ÇʼöÀûÀÎ ºÎºÐÀÌ´Ù. ƯÈ÷ Àú»ê¼Òȯ°æ
½ÇÇèÀ» À§ÇÑ O2 ÀÚµ¿ Á¶Àý ±â´É±îÁö ÀåÂøµÇ¾î ÀÖ¾î ¾Ï¼¼Æ÷ ¹× ´ç´¢
¿¬±¸¿¡ ÃÖ»óÀÇ Á¶°ÇÀ» Á¦°øÇÑ´Ù.
ÀϹÝÀûÀÎ Confocal Çö¹Ì°æÀÇ ¿ëµµ´Â ´ÙÀ½°ú
°°´Ù.
´ÙÁß
Çü±¤ ¿°»öÇÑ ¼¼Æ÷ ¹× Á¶Á÷ÀÇ 2Â÷¿ø °íÇØ»óµµ °í¹èÀ² À̹Ì¡ ¹× Á¤·®ºÐ¼®
Confocal
Çö¹Ì°æÀÇ ¿ø¸®¸¦ ÀÌ¿ëÇÑ 3Â÷¿ø Çü±¤ À̹Ì¡
Åõ°ú±¤
°ËÃâ±â¸¦ ÀÌ¿ëÇÑ ¼¼Æ÷ÀÇ ÇüÅ ºÐ¼® ¹× Çü±¤ À̹ÌÁö¿ÍÀÇ ´ëÁ¶ Confocal Çö¹Ì°æÀÇ
Ãֽбâ¹ýÀº ´ÙÀ½°ú °°´Ù.
GFP(ÃÊ·Ï»ö
Çü±¤ ´Ü¹éÁú)¸¦ ÀÌ¿ëÇÑ Àå½Ã°£ »ý¼¼Æ÷ À̹Ì¡(¾Ï¼¼Æ÷ÀÇ º¯È°üÂû)
Ä®½·
ÀεðÄÉÀÌÅ͸¦ ÀÌ¿ëÇÑ ¼¼Æ÷³»ÀÇ Ä®½· À̿ À̹Ì¡À» ÀÌ¿ëÇÑ ¹ß¾Ï ¹× ¾Ï¾ïÁ¦Á¦ °³¹ß
¿¬±¸
·¹ÀÌÀú¸¦
ÀÌ¿ëÇÑ Æ¯Á¤ ´Ü¹éÁúÀÇ ÀÚ±Ø ¹× ½Ã°£¿¡ µû¸¥ º¯È °á°ú ºÐ¼®
ÃÖ½Å
Çü±¤ ´Ü¹éÁúÀÎ PA-GFP¹× KAEDE¸¦ ÀÌ¿ëÇÑ »ý¼¼Æ÷ À̹Ì¡
3Â÷¿ø
À̹ÌÁö¸¦ ½Ã°£ °æ°ú¿¡ µû¶ó Á¦ÀÛÇÏ´Â 4Â÷¿ø À̹Ì¡
±×¿Ü
»ý¸®ÇÐ, º´¸®ÇÐ, ¾à¸®ÇÐ, ¼¼Æ÷ÇÐ ¿¬±¸¿¡ ÇÊ¿äÇÑ °íÇØ»óµµ °í¹èÀ² Çü±¤ À̹Ì¡
Confocal Çö¹Ì°æÀº Çö´ë ÀÇÇÐ ¿¬±¸¿¡ ÀÖ¾î¼
¹Ýµå½Ã ÇÊ¿äÇÑ ÀåºñÀ̸ç ÀÌ Àåºñ¸¦ ÀÌ¿ëÇÏ¿© µµÃâÇØ³½ °á°ú¹°µéÀº ¼¼°è À¯¼öÀÇ Àú³Î¿¡¼
ÀÎÁ¤ÇϵíÀÌ »ó´çÈ÷ ½Å·Úµµ°¡ ³ô´Ù. ÇöÀç ÀÌ Àåºñ¸¦ ´ëÄ¡ÇÒ¸¸ÇÑ Àåºñ´Â ¾ÆÁ÷ »ý»êÀÌ
µÇ°í ÀÖÁö ¾ÊÀ¸¸ç ¾ÕÀ¸·Îµµ ±× Á߿伺Àº ´õ¿í Áõ°¡ µÉ °ÍÀÌ´Ù.